重组表达条件优化及酶学特性！

    传统生产 GlcN 的方法是以海洋虾 蟹壳为原料, 采用强酸逐步水解制备得到, 其过程耗费时 间长且需要消耗大量酸和能量, 在工业制备 GlcN 中会对 环境造成不利影响。因此, 直接以 N-乙酰氨基葡萄糖 (N-acetylglucosamine, GlcNAc)作为原料, 避免了由虾蟹原 材料带来的季节性和过敏性的问题。恒温培养箱(上海新苗医疗器械制造有 限公司); FA 20048 分析天平(精度 0.0001 g, 上海佑科仪 器仪表有限公司); SW-CJ-1FD 超净工作台(苏州苏洁净 化设备有限公司); HR-T16M 台式高速冷冻离心机(湖南 赫西仪器装备有限公司); JY96-IIN 超声破碎仪(宁波新 芝生物科技股份有。

    将 PBS 用超纯水稀释至 0.005、0.010、0.050、0.100、 0.200 mol/L 浓度, 分别加入 GlcNAc 至底物终质量浓度为 5 g/L。取 100 μL Pd-nagA 纯酶与含有 5 g/L GlcNAc 上述 不同浓度缓冲液混合后置于水浴锅 45℃下反应 7 h, 采 用 OPA 法检测产物 GlcN 的生成量。相对酶活力的计 算是以纯水作为反应缓冲液时, 测得的酶活力定义为 100%。